免疫印迹(Western Blot)是一个用于蛋白质分析的常规技术,根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法,用于检测经电泳或斑点杂交后固定于膜上的蛋白质的检测, 从而定量或定性的确定正常或实验条件下细胞或组织中目标蛋白的表达情况。此外, 还可用于蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-RNA相互作用的后续分析,作为一种廉价、便捷、可靠的研究工具。
影响免疫印迹成败的一个主要因素是抗原分子中可被抗体识别的表位性质。因为涉及到抗原样品的变性,只有那些识别耐变性表位的抗体可以与抗原结合。多数多克隆抗体中或多或少含有这种类型的抗体,所以在免疫印迹中常选用多克隆抗体。第二个影响因素是蛋白原液中抗原的浓度。一些表达量低的蛋白在免疫印迹前常需要 通过免疫沉淀,亚细胞分离等手段富集。第三影响因素是检测体系中的各种试剂。抗体与抗原结合后,再加酶标二抗则形成抗原、一抗和酶标二抗的三元复合物。选择一种恰当的底物与三元复合物孵育,终显色形成肉眼可见的沉淀线或发光后由X光片或CCD采集到光信号。特异、稳定的液态酶标抗体和相应的底物,保证了快速、准确、灵敏的检测。
强耀生物经过不断的优化和改进,积累了大量的经验,并选用了目前市场上质量与口碑好的NC膜和化学发光底物,为您提供高效、灵敏、稳定的全套免疫印迹(western blot)技术服务。
服务编号:QY-3008
服务内容:
检测组织/细胞在不同状态下目的基因表达差异,包括:从细胞或特定组织中提取总蛋白质;用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离复杂蛋白样品;转膜;杂交:鉴定膜上的特定蛋白;显色或显影(化学发光法)。
1. Western实验设计,与客户沟通认可后执行
2.根据实验设计完成Western实验
样品要求:
A. 样品包括细胞或组织的裂解液,裂解液浓度须大于2mg/ml,每张膜需要裂解液500ug
或提供下列材料:组织: 200-400mg ;细胞:约 10 7 细胞;蛋白: 1mg
B. 抗体:
a. 您提供符合技术要求的浓缩或即用型一抗;
b. 我们也可以为您代购抗体或者定制抗体(详细情况请见抗体定制服务)
实验标准:
内参抗体或Tag抗体条带清晰,位置正确.
交付材料:
详细的实验报告