制备高特异性、高效价的抗体是实验免疫学技术的基础,抗体质量的高低将直接影响试验的成败。多克隆血清中含有复杂多样的抗体,它不仅含有针对免疫原产生的抗体,还有血清的全部抗体,此外还含有许多自身的血清蛋白。为了获得成分相对单一的抗体或将抗体用于特定的用途,就需要对抗体进行纯化处理。
纯化抗体的用途之一是降低非特异性本底,能去除引起实验误差的污染蛋白,且能精确控制实验中产生阳性信号的抗体量, 因此纯化抗体可以作为免疫化学实验中降低本底的基本手段。另外,使用纯化抗体还能进行抗体标记(减少有时使用标记二抗带来的干扰),或用于制备免疫亲和纯化柱等。
抗体纯化的方法包括DEAE离子交换色谱法、硫酸铵沉淀法及其他方法,其中蛋白G或蛋白A亲和柱法纯化较为简单、高效,抗原亲和柱法纯化则能获得针对抗原的特异性抗体。
强耀生物拥有的抗体技术服务团队,可为客户提供多种抗体纯化服务,如硫酸铵纯化、Protein A/G纯化、抗原亲和纯化等,帮助客户解决各种抗体纯化问题。
抗体纯化(硫酸铵沉淀法)
服务编号:QY-3001
服务内容:
1.硫酸铵沉淀法纯化血清(≤50 ml)
2.紫外吸收法测定抗体浓度
3.纯化抗体Elisa
终交付的材料:
纯化后抗体;SDS-PAGE抗体纯度鉴定报告;ELISA检测报告;完整实验报告。
样品要求:
抗血清,0.2 mg 抗原
注:
1.饱和硫酸铵可以在偏酸的条件下沉淀血清或者腹水中除 IgG外的蛋白质, 使上清液中只含有 IgG, 所以该法一般用来纯化 IgG1 和 IgG2b, 可用于多种动物血清及小鼠腹水中抗体及单克隆抗体的纯化。
2. 饱和硫酸铵纯化抗体的得率大约为10 mg蛋白/1 ml 抗血清;